DJ Hero 2 staví na DJských zkušenostech vytvořených jeho předchůdcem. Hráči využívají specializovaný ovladač coby DJ pult k poškrábání, mixování a manipulaci s hudebními stopami, aby vytvořili bezchybné mixy. Tohle pokračování má robustnější režim kariéry pro jednoho hráče nazvaný „Impérium“ spolu s obnoveným zaměřením na možnosti hry pro více hráčů. Společně mohou soutěžit až tři hráči, přičemž dva DJové budou bojovat na DJ pultech a třetí spoluhráč zajistí vokály pomocí mikrofonu. A nyní je zde i možnost tréninku, aby se mohli hráči zlepšit.

Klíčovým rozdílem mezi DJ Hero 2 a původní hrou je širší rozsah uváděných hudebních žánrů. Zatímco první titul se silně opíral o hip-hop, DJ Hero 2 zahrnuje prvky z tance, elektroniky a popu, aby vytvořil rozmanitější zvukovou scénu. Soundtrack obsahuje 83 mashupů vytvořených z téměř 100 písní od cca 85 různých umělců. Velmi známí DJs jako David Guetta, Deadmau5 a Tiësto nejen přispěli k soundtracku tvorbou mixů, ale jsou také hratelnými avatary ve hře.

Zatímco při spuštění byl k dispozici stahovatelný obsah pro rozšíření seznamu skladeb, vypnutí serveru Activision učinilo tuto funkci nedostupnou. To znamená, že hráči mají přístup pouze k 83 mashupům základní hry.