Autopsy Simulator je simulátor pitvy, který hráče zavede do detailně simulovaného prostředí patologa. Hra klade důraz na realistické znázornění medicínských procedur a anatomie lidského těla. Hráči se ujmou role patologa, jehož úkolem je provádět pitvy a objasňovat příčiny úmrtí.

Hráč musí používat různé lékařské nástroje jako skalpely, jehly a pily, přičemž každý nástroj má specifické použití při otevírání těla, odebírání tkání a dalších procesech. Důležitou součástí je odběr tkání a tekutin pro další analýzy, které pomohou určit příčinu smrti. Hráč musí analyzovat získané informace, spojovat stopy a vyvozovat závěry, což přidává detektivní prvek do hry.

Kromě technické stránky pitvy se hra snaží hráče vtáhnout do příběhu, kde každý případ odkrývá část většího příběhu. Může se jednat o náhodná úmrtí nebo složitější zápletky sahající až do tajemství minulosti postav. Hráči se mohou mnoho naučit o lidském těle, medicínských procedurách a forenzních metodách.